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信帆生物供應:DNA拓撲異構酶I

發布時間: 2017-12-19  點擊次數: 1073次

信帆生物供應:DNA拓撲異構酶I

 

DNA 拓撲異構酶I

產品描述:

本制品是將TopA基因(E.coli)在大腸桿菌中進行表達后,經多次純化分離而得到的。完整的DNA 拓撲異構酶IDNA Topoisomerase I)全酶是一分子量97kDa的蛋白。

DNA 拓撲異構酶I催化4種反應:

1. 催化負超螺旋DNA的松弛。

2. 在單鏈環狀DNA分子內形成繩結(Knotting)和解開繩結(Unknotting)。

3. 催化具有互補堿基序列的環狀單鏈DNA形成雙鏈閉環狀DNA分子。

4. 2個環狀雙鏈DNA分子之中的一個存在DNA鏈的切口時,發生兩個分子的連結反應(Catenation)或者逆反應(Decatenation)。

信帆生物供應:DNA拓撲異構酶I

產品用途:

1. 催化負超螺旋松弛

2. 識別錯配

3. DNA的結構轉換和解析

4. 其他科研用途

保存溫度:

-20℃

產品包裝:

產品組成

體積

DNA拓撲異構酶I(5U/ul)

10ul

10xDNA TopoI Reaction Buffer

1ml

質量保證:

經多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,無核酸內、外切酶污染。

活性定義:

一個單位定義為在25μl反應體系,37℃15分鐘條件下,能催化>95% 的0.5 μg pUC19 RF I型 (負超螺旋)DNA的解旋所需要的酶量。DNA超螺旋化通過不含EB的瓊脂糖凝膠電泳來檢測。

反應條件:

1x反應緩沖液[50mM KAc,20mM Tris-Ac,10mM Mg(Ac)2,100ug/ml BSA(pH7.9儲存于25℃)],37℃溫育。

熱失活:

65℃,20分鐘。

注意事項:

pUC19 RF I型DNA用DNA拓撲異構酶I處理后進行瓊脂糖凝膠電泳時,如果膠中含有EB染料,反應前后DNA條帶位置不發生改變。這是由經過DNA 拓撲異構酶I的作用轉換為松弛型的DNA受EB影響,再次變為超螺旋狀態造成的。因此使用DNA 拓撲異構酶I作用后,先用不含EB染料的膠行電泳,再用EB染色。

信帆生物供應:DNA拓撲異構酶I

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