植物可溶性糖含量試劑盒檢測(cè)原理

測(cè)定意義：
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。可溶性糖是指樣品中的還原單糖及在本法測(cè)定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。

測(cè)定原理：
蒽酮比色法。可用于可溶性單糖、寡糖和多糖的含量測(cè)定，具有靈敏度高﹑簡(jiǎn)便快捷﹑適用于微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。

樣品中可溶性糖的提取：
稱取0.1~0.2g 樣本，加入1mL 蒸餾水研磨成勻漿，倒入有蓋離心管中，95℃水浴10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，25℃離心10min，取上清液于10ml 試管中，用蒸餾水定容至10mL，搖勻備用。

測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至620nm，蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95 度。
3、工作液的配制：在試劑一中加入2.5mL 試劑二。充分溶解后使用，如較難溶解，可加熱攪拌；用不完的試劑4℃保存一周；

可溶性糖含量計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 8.55x - 0.07；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值。
2、按樣本鮮重計(jì)算：
可溶性糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷（W×V1÷V2）=1.17×(ΔA＋0.07) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算：
可溶性糖（mg /mg prot）=[ (ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷(V1×Cpr)=0.117×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.04mL；V2：加入提取液體積，10mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本鮮重，g。
b.用96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 4.275x - 0.07；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值。
2、按樣本鮮重計(jì)算：
可溶性糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷（W×V1÷V2）=2.34×(ΔA＋0.07) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算：
可溶性糖（mg /mg prot）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷(V1×Cpr)=0.234×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.04mL；V2：加入提取液體積，10mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本鮮重，g。
注意：最-低檢測(cè)限為1mg/g 鮮重或10ng/ mg prot