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雙鏈DNA 變性緩沖液尤其適用于Southern blot 實驗

發布時間: 2022-04-28  點擊次數: 1464次

雙鏈DNA 變性緩沖液尤其適用于Southern blot 實驗


雙鏈DNA 變性緩沖液又稱為中性轉移緩沖液,由1.5M NaCl 、微量NaOH 等組成,不含蔗糖,可用于核酸雜交等,尤其適用于Southern blot 實驗。本試劑僅用于科研領域,不宜用于診斷或其他用途。


規格:100ml/500ml

保存:室溫

有效期:12個月

用途:又稱為中性轉移緩沖液,常用于雜交

說明:由氯化鈉、堿水組成。


使用緩沖液時應注意的一些事項

1.向緩沖液中添加一些必要的穩定劑(如巰基保護劑——乙醇、多元醇、甘油、蔗糖、乙二醇、DDT等),以保護生物大分子重要的活性基團或空間結構。

2.添加金屬離子或絡合劑,以保護對金屬離子敏感(需要或不需要)的生物大分子。有些酶需要兩價的金屬離子(如Ca++,Mg++,Mn++等)作為其輔因子;有些生物大分子則要時刻防范上述酶類(如DNase,Nuclease等)對它們的降解,故要向緩沖液中添加EDTA或EGTA 等螯合劑,以保護它們不被降解。

3.添加蛋白酶抑制劑。如我們要研究蛋白質分子,在分離純化他們的過程中,必須時刻防止他們被蛋白酶所水解。為此可向緩沖液中添加PMSF或DFP(磷酸二異丙基氟),亮抑肽等。它們可分別抑制哺乳動物蛋白酶或絲氨酸蛋白酶的活力。

4.蛋白質添加劑:生物大分子需要有一定的濃度,才能保持其完整的空間構像。因此,經過一系列分離純化步驟而終得到純酶制品時,有時其濃度很低。為保持這類濃度很稀的純酶的活力,往往要向這類酶制品(特別是一些商售的限制性核酸內切酶)中人為地添加一些蛋白質,如牛血清白蛋白(BSA)或酪蛋白(Casein)等,從而既保護了目的酶的空間構象又不影響其活力。


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